無菌室的建設要求
1、工作室應矮小、平整,面積只需4米2左右,高2.2—2.3米,內部裝修應平整、光滑,無凹凸不平或棱角等,四壁及屋頂應用不透水之材質,便于擦洗及殺菌;
2、室內采光面積大,從室外應能看到室內情況;
3、為保證無菌室的潔凈,無菌室周圍需設緩沖走廊,走廊旁再設緩沖間,其面積可小于無菌室;
4、無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設有日光燈及供消毒空氣用紫外燈,殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜 ,其電源開關均應設在室外;
5、無菌室與緩沖間進出口應設拉門,門與窗平齊,門縫要封緊,兩門應錯開,以免空氣對流造成污染。
無菌室的使用與管理
1、無菌室應保持清潔整齊,室內僅存放必須的檢驗用具如酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環(huán)、玻璃鉛筆等,不要放與檢測無關的物品;
2、室內檢驗用具及凳桌等保持固定位置,不隨便移動;
3、每2—3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺、門、窗、桌、椅及地面,然后用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣,最后紫外燈殺菌半小時;
4、定期檢查室內空氣無菌狀況,細菌數(shù)應控制在10個以下,發(fā)現(xiàn)不符合要求時,應立即徹底消毒滅菌。/無菌室無菌程度的測定方法:取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養(yǎng)基平板各3個(平板直徑均9厘米),置無菌室各工作位置上,開蓋曝露半小時,然后倒置進行培養(yǎng),測細菌總數(shù)應置37℃溫箱培養(yǎng)48小時;測霉菌數(shù)則應置27℃溫箱培養(yǎng)5天。細菌`霉菌總數(shù)均不得超過10個為;
5、無菌室殺菌前,應將所有物品置于操作之部位(待檢物例外),然后打開紫外燈殺菌30分鐘,時間一到,關閉紫外燈待用;
6、進入無菌室前,必須于緩沖間更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋;
7、操作應嚴格按照無菌操作規(guī)定進行,操作中少說話,不喧嘩,以保持環(huán)境的無菌狀態(tài)。
器材及場所的滅菌消毒
微生物檢驗用器材及場所必須進行滅菌或消毒處理,不同的對象采用不同的處理方法。
1、高壓蒸汽滅菌: 工作服、口罩、稀釋液等,置高壓殺菌鍋內,一般采用121℃滅菌半小時,當然不同的培養(yǎng)基有不同的要求,應分別處理;
2、火焰滅菌: 接種針、接種環(huán)等可直接火焰滅菌;
3、高溫干燥滅菌: 各種玻璃器皿、注射器、吸管等,置于燥箱中160℃滅菌2小時;
4、一 般消毒: 無菌室內的凳、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進行滅菌,必須用其他方法進行消毒處理,采用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭消毒,工作人員的手也用此法進行消毒;
5、空氣的消毒: 開啟紫外燈照射30—60分鐘即可。
6、 操作要領:
1)準備工作
. 先進行無菌室空間的消毒,開啟紫外燈30—60分鐘;
. 檢驗用的有關器材, 搬入無菌室前必須分別進會滅菌消毒;
. 操作人員必須將手清洗消毒,穿戴好無菌工作衣、帽和鞋,才能進入無菌室;
. 進入無菌室后再一次消毒手部,然后才進行檢驗操作。
2)操作過程注意事項
. 動作要輕,不能太快,以免攪動空氣增加污染;玻璃器皿也應輕取輕放,以免破損污染環(huán)境;
. 操作應在近火焰區(qū)進行;
. 接種環(huán)、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒,灼燒時先通過內焰,使殘物烘干后再灼燒滅菌;
. 使用吸管時,切勿用嘴直接吸、吹吸管,而必須用洗耳球操作;
. 觀察平板時不好 開蓋,如欲沾取菌落檢查時,必需靠近火焰區(qū)操作,平皿蓋也不能 大開,而是上下蓋適當開縫;
. 進行可疑致病菌涂片染色時,應使用夾子夾持玻片,切勿用手 直接拿玻片,以免造成污染,用過的玻片也應置于消毒液中浸泡消毒,然后再洗滌;
. 工作結束,收拾好工作臺上的樣品及器材,最后用消毒液擦拭工作臺。
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